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精子细胞毒试验

导读:4pbs作1∶10稀释,以500r/min30min离心洗涤一次,弃去上清,沉渣用pbs调整精子浓度为100106/ml的精子悬液。

精子细胞毒试验

(二)伊红y染色法

【准备】

(1)用蒸馏水配制4%伊红y染液。

(2)配制0.01mol/l,ph7.4pbs溶液。

【方法】

(1)取正常新鲜精液(精子浓度宜大于:60×106/ml),用ph7.4的pbs洗涤3次,调整精子浓度为10×107/ml。

(2)取精子悬液16μl,移置载玻板的漆孔内,分别设2个测定和对照孔,另取待检血清20μl,补体血清4μl加入测定孔内,对照孔只加待测血清不加补体,充分混匀。

(3)把玻板移入湿盒内,在37℃孵育30min,每孔加4%伊红y4μl,加上盖玻片使其作用2min,进行镜检。

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