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定量的精子制动化试验

导读:而且通常用于凝集试验的被检血清都要先行稀释4~16倍,判断凝集的精子从2条精子的小凝集块到上百条精子以上的大凝集块,强弱差距很大,所以要定量测定抗精子抗体的效价很困难。

定量的精子制动化试验

为了观察人体血液中抗精子抗体的动态变化,了解病情的转归及治疗效果,实施抗体的定量测定是非常必要的,但历来所用的抗体定性测定方法,都不能解决这一问题。虽然把原血清作对倍稀释之后做精子凝集试验,也可大致了解抗精子抗体的强弱程度,但精子凝集试验难以把非特异性的精子凝集与抗精子抗体引起的特异性精子凝集相鉴别。而且通常用于凝集试验的被检血清都要先行稀释4~16倍,判断凝集的精子从2条精子的小凝集块到上百条精子以上的大凝集块,强弱差距很大,所以要定量测定抗精子抗体的效价很困难。

半定量精子制动化试验是以被检原血清进行抗精子抗体测定,当抗体效价不很强,被检血清的精子活动率(t)在60%~20%之间时,与对照血清的精子活动率(c)可以进行比较(c/t),若血清抗体效价很强,t的精子活动率在3%~1%之间,c/t比较则失去意义。假如t的活动率变为0,c/t比较值(siv)变成无限大(∞),这时就无法测出抗体量到底有多少。定量的精子制动化试验的特点在于先把被检血清做对倍稀释,按半定量法求出各稀释度的精子活动率(t),随后测定标准阴性对照血清的精子活动率(c),然后按公式c-t/c×100计算出精子制动化率(y)。当抗体效价高时,精子活动率(t)接近于0,而y值接近100,随着血清对倍稀释,t值逐渐接近c值,这时y将接近于0。若把血清稀释倍数作横轴,把各稀释度的y作纵轴,根据y的变化,就可以绘出精子制动化率递减图,将递减曲线与50%y的直线相交点,称为50%精子制动化指数,这个指数的血清稀释倍数,就是我们要寻找的50%精子制动化抗体效价(si),si值不但能准确地表示抗体量,而且重现性很好。由于检测的指标是精子活动率,所以反应时间是关键因素。香山浩二等人研究指出,1~3h之内测定的si值误差性小,随着反应时间延长,si值的误差性变大。因此,要作不同检体的si比较,必须规定在一定时间内进行,如果每次测定有标准阳性血清的si作对比,这对修正被检血清si的误差性极为重要。临床测定以2~3h内判断si值为最好。

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